Tomoyo Ochiishi, chercheur principal, Brain Genetics Research Group, Biomedical Research Institute, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, professeur adjoint Akira Kitamura, Graduate School of Advanced Life Sciences, Hokkaido University, Hideki Shimura, professeur agrégé, département de neurologie, Juntendo Faculté de médecine de l'Université, etc. Nous avons développé une technologie pour visualiser la dynamique de la protéine amyloïde (Aβ), qui est l'un des facteurs responsables, dans les cellules nerveuses vivantes et in vivo.
Aβ polymérise facilement et forme de gros agrégats.La protéine fluorescente verte (GFP) est souvent utilisée pour observer la localisation des protéines dans les cellules vivantes et les individus, mais la protéine dans laquelle Aβ et GFP sont fusionnés (Aβ-GFP) est une protéine obtenue en polymérisant Aβ. On dit que la fluorescence est inhibé.Par conséquent, même si elle était exprimée in vivo, la fluorescence n'était pas observée lorsque Aβ était polymérisé, et il était difficile de visualiser la localisation et la dynamique de Aβ.
Jusqu'à présent, lorsque 12 acides aminés ou moins étaient utilisés comme séquence d'acides aminés (linker) reliant Aβ et GFP, la fluorescence de la GFP disparaissait lorsque Aβ polymérisait.Cette fois, nous avons développé une protéine de fusion qui utilise 14 acides aminés comme lieur et peut observer la fluorescence quel que soit l'état de polymérisation de Aβ.Il a été constaté que cette Aβ-GFP ne dépasse pas un certain niveau du fait de la fusion de la GFP, et existe à l'état d'oligomère centré sur un dimère à l'intérieur et à l'extérieur du corps vivant.Cela permet d'analyser le mouvement dynamique d'Aβ dans les cellules vivantes et l'état d'accumulation dans les neurones primaires en culture.De plus, puisqu'il forme des oligomères Aβ hautement toxiques impliqués dans la survenue de la maladie d'Alzheimer, il est possible d'analyser la relation entre le degré de polymérisation des oligomères Aβ et leur toxicité pour les cellules.
À l'avenir, il devrait contribuer au criblage de substances candidates pour les agents thérapeutiques de la maladie d'Alzheimer en utilisant des cellules en culture et des individus vivants, et à l'élucidation du mécanisme d'apparition de la maladie d'Alzheimer.
